Neuartige Methode des ELISpot Assays unter Verwendung von von Alexander Johannes Straub | ISBN 9783843948258

Neuartige Methode des ELISpot Assays unter Verwendung von

von Alexander Johannes Straub
Buchcover Neuartige Methode des ELISpot Assays unter Verwendung von | Alexander Johannes Straub | EAN 9783843948258 | ISBN 3-8439-4825-9 | ISBN 978-3-8439-4825-8

Neuartige Methode des ELISpot Assays unter Verwendung von

von Alexander Johannes Straub
Inhaltlicher Schwerpunkt dieser Forschungsarbeit ist das hier zum ersten Mal beschriebene, multifunktionelle „CHic-bare“ und „Click-bare“ Copolymersystem, welches die Grundlage zur Generierung oberflächengebundener Hydrogele auf (polymeren) Trägermaterialien (z. B. Mikrotiterplatten) bildet. Die photoaktiven Monomerbausteine der Copolymere können während UV-Belichtung über C, H-Insertionsreaktionen („CHic“) abreagieren, was zur Netzwerkbildung und kovalenten Oberflächenanbindung führt. Bei Verwendung einer Photomaske kann eine Mikrostrukturierung der proteinabweisenden Hydrogel-Beschichtung erreicht werden. Die Azid-Monomerbausteine können mit einem geeigneten Reaktionspartner (z. B. ein Alkin-modifiziertes Protein) über Azid-Alkin-Cycloadditions(AAC)-Reaktionen („Click“-Reaktionen) reagieren, wodurch eine spezifische Funktionalisierung der Beschichtung möglich ist. Die maßgeschneiderten Hydrogel-Beschichtungen in Mikrotiterplatten, welche eine vergleichbar hohe Biotin-Bindungskapazität besitzen, können zur effizienten Vereinzelung von Polystyrol-Modellpartikeln und Zellen verwendet werden. Es konnte gezeigt werden, dass die auf derartigen Beschichtungen durchgeführten ELISpot-Assays (Enzyme-Linked Immunospot Assays) eine höhere Empfindlichkeit besitzen und dass die resultierenden ELISpot-Flecken eindeutig zuordenbar sind. Ausblickend ist dargestellt, dass die Copolymere aufgrund ihrer modularen Chemie durch nasschemische und/oder photochemische Modifizierung für weitere Oberflächenanwendungen von Interesse sind. Somit eröffnet die Kombination der universellen „CHic“-Reaktion mit der sehr effizienten „Click“-Reaktion völlig neue Wege für Oberflächenanwendungen im Bereich der Materialwissenschaften.